Pro léčbu pomocí metod asistované reprodukce jsou oocyty získávány punkcí z ovariálních folikulů po předchozí stimulaci ovarií. Punkce je prováděna vaginální cestou pod ultrasonografickou kontrolou.
V laboratoři z folikulární tekutiny embryolog vyhledává oocyty a přenáší je do fertilizačního média.
V den odběru vajíček se získá od partnera vzorek spermií. Před jejich použitím k vlastnímu oplození je potřeba vyhodnotit spermiogram a následně vzorek zpracovat. Spermie se proplachují v médiu a k oplození se použijí ty, které aktivně vycestují do čistého média.
Cílem přípravy spermií je odstranění seminální plazmy, bakterií, leukocytů. Jejich ponechání v připraveném vzorku spermií by vedlo k poškození spermií a následně i k poškození oocytů. Při potvrzené azoospermii (nepřítomnost spermií v ejakulátu) je někdy možné získat spermie chirurgickým způsobem z tkáně varlete pomocí metod MESA/TESE.
K vlastnímu oplození vajíček spermiemi v podmínkách in vitro lze použít jednu za dvou metod nebo jejich kombinaci.
Konvenční IVF – do fertilizačního média k oocytům přidáme suspenzi spermií. K oplození dochází spontánně, spermie docestují k vajíčkům a proniknou přes jejich obaly.
ICSI – intracytoplazmatická injekce spermie do vajíčka - je náročná mikromanipulační technika, kdy je spermie nasáta do velmi tenké skleněné kapiláry a vpravena do cytoplazmy vajíčka.
Kterou z metod oplození oocytů použít, vám doporučí embryolog po odběru vajíček.
Po 16–18 hodinách se zjišťuje výsledek fertilizace. Oplozená vajíčka se kultivují ve speciálních médiích v inkubátoru 2–5 dní, do doby než jsou zavedena do dělohy.
Kultivace embryí se obvykle prodlužuje nad 48 hodin, což umožní lepší posouzení vývoje jednotlivých embryí a výběr těch nejkvalitnějších k transferu. Zpět do dělohy se přenáší 1 nebo 2 embrya.
V ojedinělých případech je potřeba provést před transferem embrya narušení jeho obalu, tzv. asistovaný hatching. Tato embrya mají zesílenou zónu pellucidu bránící vymanit se v pozdějším stadiu vývoje z tohoto obalu a implantovat se do sliznice dělohy.
Nadbytečná, dobře se vyvíjející embrya lze konzervovat jejich zmrazením a uchovávat je pro případný pozdější přenos. Představují další možný transfer embryí a šanci na těhotenství bez opakované hormonální stimulace a odběru vajíček. Ne všechna embrya ale přežijí proces zmrazení a opětovného rozmrazení.